午夜视频在线播放_亚洲综合久_日韩三级在线_国产99视频精品免费视频免里_成人观看天堂在线影片_日韩在线观看视频网站

設為首頁 | 加入收藏
技術文章首頁 > 技術文章 用這個方法來操作轉染試劑,工作效率更高哦!
  • 用這個方法來操作轉染試劑,工作效率更高哦!
  • 點擊次數:2229 更新時間:2019-08-13
  • 0
  •    轉染試劑是一種多聚陽離子聚合物,具有較高的陽離子電荷密度使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”(protonsponge)體。這種聚陽離子能將各種報告基因轉入各種種屬細胞,其效果好于脂質聚酰胺,經進一步的改性后,其轉染性能好于樹枝狀聚合物,而且它的細胞毒性低。
     
      轉染試劑操作步驟:
      所列步驟適用于24孔板培養的哺乳動物細胞,其他培養材料,請參考表1按照轉染規模調整,所有數量和體積均是按孔計算。大部分細胞系所使用的DNA(μg)與VigeneFection(μg)的比值為1:3或1:4,轉染狀態良好的細胞可獲得高轉染效率、高表達水平和低細胞毒性。
      1、貼壁細胞:轉染前一天每孔0.5-2×105個細胞接種于500μl培養基中,在轉染時細胞可長至90-95%融合;懸浮細胞:在配制轉染液前每孔4-8×105個細胞接種于500μl培養基中。
      2、轉染液制備,每孔細胞用量如下:
      A、用50μlDMEM培養基稀釋質粒DNA,輕輕混勻。
      B、取適量VigeneFection在50μlDMEM培養基中稀釋,室溫孵育5min。
      C、將前兩步所稀釋的DNA和VigeneFection混合,輕輕混勻,室溫放置30min。
      3、在每孔細胞中加入混合后的轉染液,輕輕搖勻。
      4、貼壁細胞可在轉染4-6h后可更換培養基,懸浮細胞可在轉染后的18-48h之間,對細胞進行換液。轉染18-48h之后可檢測基因表達。如果檢測到蛋白表達,請在轉染后24-72h收集培養液。
      5、對于穩定轉染,在轉染24h后以1:10傳代培養,第二天可加入選擇培養基。
     
      轉染試劑注意事項:
      推薦在混合前使用Opti-MEM(Cat.No.267485)或DMEM細胞培養基(Cat.No.SH30022.01B)稀釋VigeneFection和核酸。
      轉染過程中勿向培養基中添加抗生素,以免造成細胞死亡。
      不同批次實驗請保持細胞接種條件相同。
      轉染前細胞的狀態好壞對終的轉染效果高低影響很大,請務必保證轉染前,細胞處于良好的生長狀態。
  • 上一篇:鬼筆環肽的這些特性是你不知道的
  • 下一篇:詳細分析組織細胞固定液的使用方法及注意事項
移動電話
400-998-5068
點擊這里給我發消息

化工儀器網

推薦收藏該企業網站
主站蜘蛛池模板: 我把寡妇日出水好爽视频 | 欧美激情第二页 | 国产九色在线 | 日韩在线第二页 | 国产成人91激情在线播放 | 一级黄色绿像片 | 色综合国产 | 欧美日韩亚洲一区二区 | 中文成人在线 | 国产成人+综合亚洲+天堂 | 91看片淫黄大片欧美看国产片 | 一区二区三区四区在线 | 国产精品婷婷 | 久久久久久久国产精品毛片 | 男人用嘴添女人下身免费视频 | 激情宗合网 | 午夜伦理影院 | 九九热在线免费观看 | 国内精品久久久久久2021浪潮 | 草色在线 | 91在线观看 | 四虎网址 | 午夜免费观看福利片一区二区三区 | 亚洲福利视频一区二区 | 日本黄色一级片视频 | 成人精品鲁一区一区二区 | 久久久久99 | 性爽爽| 成人免费高清 | 欧美色黄视频 | 日本不卡一区二区三区在线观看 | 色婷婷99综合久久久精品 | 新白娘子传奇50集免费赵雅芝版 | 香港三级台湾三级在线播放徐 | 亚欧成人中文字幕一区 | 中文字幕在线观看视频一区 | 蜜桃视频在线免费播放 | 正在播放国产精品 | 日韩精品久久久久久久电影 | 久久中文网 | 成人全黄三级视频在线观看 |